高效液相色谱仪测定地肤子中的地肤子皂苷Ic含量

高效液相色谱仪测定

地肤子中的地肤子皂苷IC含量

2018年4月

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1摘要

   本文根据《中国药典》2015版要求，测定中药地肤子中地肤子皂苷Ic含量的高效液相色谱方法，按中国药典条件，使用赛那尔E800蒸发光散射检测器，设置色谱柱柱温为30℃，地肤子皂苷Ic保留时间RSD%在0.17%，峰面积RSD%为1.43%。

关键词：中药 地肤子 地肤子皂苷Ic  E800 蒸发光散射检测器  高效液相色谱 HPLC

地肤子呈扁球状五角星形，直径1～3mm。外被宿存花被，表面灰绿色或浅棕色，周围具膜质小翅5枚，背面中心有微突起的点状果梗痕及放射状脉纹5～10条；剥离花被，可见膜质果皮，半透明。种子扁卵形，长约1mm，黑色。气微，味微苦。

地肤子的有效成分地肤子皂苷Ic具有清热利湿、祛风止痒等功效，地肤子皂苷Ic(Momordin Ic)是地肤子中药中抗瘙痒，抗炎和抗过敏作用的主要有效成分。

图1 地肤子皂苷Ic结构式

2检测部分

2.1仪器

本实验使用赛那尔H6000高效液相色谱仪系统。具体配置为H6000系列的两台输液泵、一台E800蒸发光散射检测器检测器、一台柱温箱溶剂管理器和spark Alias自动进样器；sainaer色谱工作站。

2.2  分析条件

色谱柱：SAINAER C18 4.6*250mm 5um

流速：1ml/min

柱温：30℃

气体流量：2.5L/min

蒸发温度：80℃

进样量：10μL

流动相：甲醇：0.2%冰醋酸=85:15（V/V）

等度洗脱

2.3  标准品溶液的配制和样品处理

标准品品溶液的制备  取地肤子皂苷Ic对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。

样品溶液的制备  取地肤子粉末（过三号筛）约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，放置过夜，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即可得到地肤子样品溶液。

3结果

3.1   赛那尔色谱工作站中对照品的色谱图

3.2   线性关系

将配制浓度为0.5mg/ml的地肤子皂苷Ic标准溶液，分别精密吸取对照品溶液2μL、4μL、6μL、8μL和10μL，注入H6000高效液相色谱仪，测定，以峰面积对数为横坐标，已进样量对数为纵坐标绘制工作曲线，所得曲线良好，R达到0.999以上。标准品的浓度及峰面积的结果见表1。

 图3 地肤子皂苷Ic的标准曲线  

3.3   精密度试验

0.5mg/ml的地肤子皂苷Ic标准品连续测定6次，考察方法的精密度，保留时间和峰面积的RSD%结果如表2所示：

3.4   样品测试

使用2.3配制好的地肤子样品溶液得出图4图谱：

图4 地肤子样品图谱（峰1为地肤子皂苷Ic）

4结论

经方法测试，本方法的工作曲线好，R=0.999以上。数据重现性好，地肤子皂苷Ic保留时间RSD%=0.17%（n=6），小于国家要求0.5%以内，峰面积RSD%=1.43%（n=6），小于国家要求3.0%以内；并且峰形完好，拖尾因子为1.03。说明药典2015版中方法适用于检测地肤子皂苷Ic的含量。

5客户现场照片