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色谱常见问题问答

Date: 2021-09-17 8:38:42 * 浏览: 143
问:用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移,有时发生快速变化,原因何在?如何解决?
答:关于漂移问题:
1、温度控制不好,解决方法是采用恒温装置,保持柱温恒定
2、流动相发生变化,解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等
3、柱子未平衡好,需对柱子进行更长时间的平衡
关于快速变化问题:
1、流速发生变化,解决办法是重新设定流速,使之保持稳定
2、泵中有气泡,可通过排气等操作将气泡赶出。
3、流动相不合适,解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合
 
问:液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么?
答:1、筛板堵塞或柱失效,解决办法是反向冲洗柱子,替换筛板或更换柱子。
2、存在干扰峰,解决办法为使用较长的柱子,改换流动相或更换选择性好的柱子
 
问:为什么进样器内的玻璃衬套会对色谱行为造成影响?
答:进样器内的玻璃衬套主要有下列作用:
1、提供一个温度均匀的汽化室,防止局部过热。
2、玻璃的惰性不如不锈钢好,减少了在汽化期间样品分解的可能性。
3、易于拆换清洗 ,以保持清洁的汽化室表面,一些痕量非挥发性组分会逐渐积累残存于汽化室,高温下会慢慢分解,使基流增加,噪声增大,通过清洗玻璃衬套可以消除这种影响。
4、可根据需要选择管壁厚度及内径适宜的玻璃衬套,以改变汽化室的体积,而不用更换整个进样加热块。从以上几个方面可以知道玻璃衬套对色谱行为造成影响的原因。
 
问:HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法
答:1、样品量不足:解决办法为增加样品量
2、样品未从柱子中流出:可根据样品的化学性质改变流动相或柱子
3、样品与检测器不匹配:根据样品化学性质调整波长或改换检测器
4、检测器衰减太多:调整衰减即可。
5、检测器时间常数太大:解决办法为降低时间参数
6、检测器池窗污染:解决办法为清洗池窗。
7、检测池中有气泡:解决办法为排气。
8、记录仪测压范围不当:调整电压范围即可。
9、流动相流量不合适:调整流速即可。
10、检测器与记录仪超出校正曲线:解决办法为检查记录仪与检测器,重作校正曲线。
 
问:我购买的液相色谱柱验收测试时柱压过高,请问为什么?
答:柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的问题,您可按下面步骤检查问题的起因。
1、拆去保护柱,看柱压是否还高,否则是保护柱的问题,若柱压仍高,再检查;
2、把色谱柱从仪器上取下,看压力是否下降,否则是管路堵塞,需清洗,若压力下降,再检查。
3、将柱子的进出口反过来接在仪器上,用10倍柱体积的流动相冲洗柱子,(此时不要连接检测器,以防固体颗粒进入流动性)。这时,如果柱压仍不下降,再检查;
4、更换柱子入口筛板,若柱压下降,说明你的溶剂或样品含有颗粒杂质,正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。