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高效液相色谱仪的用途及应用

Date: 2020-10-05 14:48:06 * 浏览: 119

高效液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谱的理论,把原来的流动性改变为最高压力可达到4.9′107Pa。色谱柱则是用特殊的方式用小颗粒装填而成。造成的结果就是色谱柱的柱效远远高于原始的经典液相色谱。并且它柱子使用后还能具有高度灵敏度检测器。能够对流出来的分析物进行连续检测。

通俗来讲就是:

多年前大学老师讲的,至今认为是最形象的对“色谱”的描述—讲一群女孩子去逛街,街上店铺林立,但是每个女孩子都有自己不同的喜好于是有的进了这家,有的进了那家,最后大家越走越分散,所以有的先走出这条街,有的后走出来—女孩子指化合物,这条街是色谱柱。店铺是固定相,推着化合物走得是流动相,提供动力的是泵,最后站在街尾数人数认人的是检测器。认人带着照片啥的是标准品,认出来走到倒数第二个的女孩就是你朝思暮想的那位。就可以定义或定量分析了。 不知道你听明白没?这就高效液相色谱的原理。

二:高效液相色谱仪的应用

1.高效液相色谱仪在食品安全领域的应用

食品添加剂的检测

食品添加剂主要常用的有三类:分别是防腐剂、甜味剂和色素。添加剂的检测方法多种多样,例如气象法,比色法等,但是液相色谱法的优势非常明显,故现代检测技术中,多偏向于使用液相色谱法来检测。 在防腐剂检测方面,骆和东等[5] 用Hypersil ODS色谱柱,流动相为0.02mol/L pH5.0乙酸铵甲醇溶液,柱温35℃,在不同波长下同时测定苯甲酸和山梨酸。 在合成色素的检测方面,吴敏[6]等采用Zorbax 80A Extend—C8色谱柱,高效液相色谱仪配备紫外检测器,同时测定食品中对位红和苏丹红等8种脂溶性燃料。 近几年随着色谱柱填充制备技术的高速发展,已经可以一次性分离糖精钠、安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸、柠檬黄、苋菜红、亮蓝这十种食品常用添加剂。其效率之高非其他仪器分析方法可比。

食品中危害物质的检测

食品中有害物质主要可分为:农药、兽药残留;霉菌毒素;重金属;加工过程中高温或其它特殊条件下形成的致癌物质等。 黄曲霉毒素普遍存在于多种谷物类食品当中,具有极强的致畸致癌作用,王君[7] 等用HyPersil ODS—C18色谱柱,测定食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2含量,该方法方便快捷,定性准确,较传统的点板法,酶联免疫吸附法更为科学准确。 高效液相色谱法在应对2008年奶粉掺入三聚氰胺风波的检测中发挥了重要作用,面对全国众多乳制品企业的样品进行检测,尽快出具检测结果给老百姓一个公正准确的结果,检测方法必须既要快,又要准,检出量还非常微小,能做到完美完成这一任务的,仅有高效液相色谱法能够做到。目前检测三聚氰胺的方法主要有高效液相色谱法、酶联免疫法、气相色谱质谱联用法、液相色谱质谱联用法。其中液相色谱质谱联用法由于能够快速地对三聚氰胺定性与定量,已成为大家首选的检测方法

2.高效液相色谱仪在工业上的应用

以往,在石油化工、农药、环保等方面,经常采用薄层色谱法(TLC)和气相色谱法(OC)进行含量测定,而液相色谱法(LC)只是用于对组分标样的测定和分离的可能性的研究。 自七十年代以来,我国就有数家科研部门以及工厂前后研制并生产了液相色谱仪。LC开始在我国许多科学领域进入了实用阶段,尤其是对那些热稳定性差或蒸气压低的样品组分的分析,更显示了LC的优越性[8] 。 近几年来,HPLC在油品分析,尤其是在石油中多环芳烃、重质烃的测定方面取得了突破性的进展。苟爱仙等[9] 以正己烷、二氯甲烷为流动相,用多维高效液相色谱技术及适宜的梯度淋洗条件,实现了渣油各烃族良好的分离和检测。吕振波等 [10] 同样用HPLC对润滑油基 础油的化学族组成进行了分离分析,以键合氰基柱和硅胶柱双柱切换的方式,正己烷为流动相,示差折光检测器检测,得到了不同产地和馏程的基础油烃类的族组成。

3.高效液相色谱仪在生命科学领域的应用

生命科学研究工作中,最大的难题就是基因的解密工作,从基因组DNA序列尚不能回答某基因的表达时间、表达量、蛋白质翻译后加工和修饰的情况、以及它们的亚细胞分布等等。这些在基因组中不能解决的问题可望在蛋白质组学(Proteome)研究中找到答案。在所研究的细胞中会有3~5万种功能各异的蛋白质,目前蛋白质组研究所使用的双向电泳法一般只能分辨到2000~3000个蛋白质点。现代蛋白质组的分析可尝试使用第一向是体积排阻色谱的双向HPLC高效液相色谱作预分离。高效液相色谱和双向电泳将会成为蛋白质组学的重要分离工具。因此,高效液相色谱仪将为深入地揭示生命奥秘作出更大的贡献。

高效液相色谱仪越来越在生活中的衣食住行各个行业起到更多的作用。