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高效液相色谱仪紫外吸收检测器概论

Date: 2019-11-13 10:29:02 * 浏览: 265
紫外吸收检测器是高效液相色谱仪中使用最广泛的检测器。

一、工作原理:

紫外吸收检测器是基于朗伯-比耳定律,根据被测组分对紫外光或可见光具有吸收,且吸收强度与组分浓度成正比的关系进行检测。

二、结构:

由光源、分光系统、样品池和检测系统等组成。

三、类型:

1、固定波长紫外吸收检测器:

由低压汞灯提供固定波长 254nm(或 280nm)的紫外光经入射石英棱镜准直,再经遮光板分为一对平行光束分别进入流通池的测量臂和参比臂。经流通池吸收后的出射光,经过遮光板、出射石英棱镜和紫外滤光片,只让 254nm 的紫外光被双光电池接收,光强度经对数放大器转化成吸光度后输送至记录仪。

为减少死体积,流通池的体积很小,仅为 5~l0uL,光路约 5~10mm,常采用H形结构。

2、可变波长紫外吸收检测器:

光源波长选择可任意可调,应用非常广泛。

(1)可选择组分的最大吸收波长作为检测波长,提高检测灵敏度。

(2)可选择组分有强吸收而干扰无吸收的波长进行检测,提高分析的选择性。

(3)梯度洗脱时,可选择流动相改变而其吸光度不变的波长进行检测,有利于梯度洗脱。

(4)可选择的波长范围很大,既提高检测器的选择性,又可选用组分的最灵敏吸收波长进行检测,提高检测灵敏度。

(5)具有有停流扫描功能,可绘出组分的光吸收谱图,以进行吸收波长的选择。

3、光电二极管阵列检测器:

属于多波长快速扫描紫外吸收检测器,是高效液相色谱仪最有发展前途的检测器。

四、特点:

1、应用广泛。

2、灵敏度高。

3、线性范围宽。

4、对流动相的温度和流速变化不敏感。

5、适于梯度洗脱。

五、不足:

1、只能用于检测能吸收紫外光的组分。

2、溶剂要选用无紫外光吸收的物质。

3、紫外光不透过的溶剂不能检测(如苯等)。

六、应用:

对大部分有机物有响应。