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高效液相色谱ELSD

Date: 2019-05-22 9:06:31 * 浏览: 233
     高效液相经常使用粒径5um 的色谱柱,用过一段时间后,柱压会略有升高,尤其是做中药。常用来洗色谱柱的溶剂为甲醇,当色谱柱用甲醇洗过之后,再用含乙腈的流动相平衡,会使柱压迅速升高,色谱柱滴漏,这是由于甲醇和乙腈汇合产生局部高压。因此,这种情况下,应慢慢升高流速,可以从0.6ml/min开始,一步步的平稳柱压,防止色谱柱漏液。可能是因为:ODS柱上有未完全硅烷化的羟基,与甲醇结合性好,当遇到乙腈时,乙腈慢慢取代甲醇的位点,但是乙腈没有羟基,结合性比甲醇差,所以产生了局部高压.
 195-210mn之间的末端吸收的波长下检测,干扰极大,往往得不偿失,除非灯是新装上的。可以考虑用ELSD检测器,属于通用型检测器,只要条件控制得好,结果一般都很理想。而且ELSD可除去溶剂和流动相的干扰,要知道甲醇在205nm时,吸收度为0.667.在用ELSD做标准曲线的时候,不一定呈线性关系.