新闻动态

首页> 新闻动态

凝胶色谱仪分离机理

Date: 2019-05-14 10:14:14 * 浏览: 170
凝胶色谱仪是利用大小不同的分子在多孔固定相(凝胶)中的选择性渗透来分离的,适用于分离分子量不同的大分子物质(Mr>2000)。

一、洗脱顺序:

凝胶色谱中组分与凝胶之间无作用力,只是根据分子量大小来分离。凝胶是有一定孔径分布范围的多孔物质,组分进入色谱柱后,向凝胶的孔中扩散,保留程度取决于孔和组分分子的大小。小分子全部渗入小孔中,在流经色谱柱时经历的路程最长。大分子完全被排斥在孔外,经历的路程最短。中等大小分子渗入部分较大的孔,而被较小的孔排斥,经历的路程居中。故洗脱顺序是组分分子大小(分子量)的函数。

二、分配系数 K:

组分进入色谱柱,从高浓度的流动相向凝胶的孔中扩散,扩散平衡时:

小分子一半在孔内,一半在孔外,K = 1。

大分子(直径大于凝胶孔径),被全部排斥在凝胶孔隙外,K = 0。

中等大小分子的直径介于以上两种极限之间,0<K<1。

故在凝胶色谱中,0≤K≤1。