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RP-HPLC法测定金钱草中槲皮素和山奈素两种黄酮成分的含量

Date: 2018-12-28 8:59:10 * 浏览: 314
摘要:目的建立同时测定金钱草中槲皮素和山奈素两种黄酮含量的反相高效液相色谱法,用于金钱草质量标准的研究。方法ODS柱,甲醇-水-磷酸(500:500:1)的反相高效液相色谱系统。结果槲皮素和山奈素分别在3.195×0.001~0.15975μg,3.252X0.001~ 0.1626μg范围内呈良好线性关系,相关系数分别为0.9999和0.9999,平均回收率分别为97.58%和102.7%,RSD分别为1.16%和1.O1%。结论本方法简便可靠,准确,分离度好,可用于金钱草的质量控制。
    关键词:反相高效液相色谱法;金钱草;槲皮素;山奈素;黄酮
    金钱草为报春花科多年生草本植物过路黄(Lysimachia christinae Hance)的全草;清利湿热、通淋、消肿。为热淋、石淋、黄疸、疮毒之要药,煎剂有显著利尿作用,并能促进胆汁从胆管排出,有排石作用。抗菌实验对金黄色葡萄球菌有抑制作用,金钱草总黄酮及酚酸有抗炎作用。茎叶主要含酚性成分、甾醇、黄酮类、氨基酸、鞣质、挥发油、胆碱等;根含皂苷。除用聚酰胺柱分离了槲皮素和山奈素等5种黄酮类成分的报道外,对其单成分含量测定的方法在文献中少见报道。    我们应用RP-HPLC法对其中的两种黄酮成分进行含量测定,为质量标准研究提供科学依据。
    1 仪器与试药
    瑞士Mettler Toledo AG285电子天平;DZF-1真空干燥箱;ZQ-250  超声波清洗 器;美国安捷伦公司高效  液相色谱 仪Agilentl100 Series,配置四元泵,自动进样器(进样范围为0.1~100μ1),紫外可见光检测器,柱温箱,在线真空脱气泵,色谱工作站等。
    槲皮素和山奈素对照品均由中国药品生物制品检定所提供;金钱草购自四川,经鉴定为报春花科过路黄的全草,符合《中国药典}2000版一部规定;甲醇为色谱纯;水为超纯水;其余试剂均为分析纯。
    2 方法与结果
    2.1 色谱条件和系统适应性
    色谱柱:Alltima Cl8柱(150mmX4.6mm,5μm);流动相:甲醇-水-磷酸(500:500:1)(0.45μm微孔滤膜滤过,用前超声脱气);检测波长:360nm;柱温:30℃:流速:1.0ml/min。
    在此色谱条件下,测得槲皮素(Q)、山奈素(K)对照品贮备液和供试品溶液色谱图.
    可见槲皮素(Q)峰的保留时间约为9.8 min,山奈素(K)峰的保留时间约为18.1min;图Q、K两峰与相邻峰分离度均大于1.5,理论塔板数分别为3700和6229。
    2.2 溶液的配制
    2.2.1 对照品溶液的配制 精密称取经五氧化二磷干燥过夜的槲皮素(Q)和山奈素(K)对照品适量于同一量瓶中,加甲醇制成每毫升含0.Olmg的混合溶液,作为对照品贮备液(Q为1.065 X 0.01mg/ml,K为1.084X 0.01 mg/ml)。
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